Validación de pruebas ELISA IgM anti-Toxoplasma para uso en programas de tamización en recién nacidos / Validation of anti-Toxoplasma IgM ELISA tests in newborn screening programs

Objetivos. Evaluar y determinar el punto de corte para la detección de IgM anti-Toxoplasma por el método ELISA, en muestras de sangre de cordónumbilical, mediante dos ensayos comerciales diferentes, y correlacionar los resultados obtenidos con el diagnóstico de toxoplasmosis congénitarealizado por seguimiento serológico y los datos clínicos. Métodos. Se evaluó la prueba IgM anti-Toxoplasma ELISA de Vircell®, frente a los resultados por Western blot e IgM ELISA de Labsystems®. Seestudiaron 105 muestras de cordón umbilical de niños colombianos, obtenidas de seis ciudades diferentes por Western blot y seguimiento clínico yserológico en aquellos positivos. Se obtuvo una curva receptor-operador (ROC) para la prueba ELISA IgM anti-Toxoplasma de Vircell® y de Labsystems®. Se analizó la concordancia entre pruebas en 105 sueros obtenidos de cordón umbilical. Resultados. El mejor desempeño para la prueba Vircell® fue con un punto de corte de índice 8 y la prueba de Labsystems® con un punto de cortede 16 inmunounidades enzimáticas. Frente al Western blot, la prueba Vircell® tuvo una sensibilidad de 100 % (IC 95%; 71,8-100) y una especificidadde 78 % (IC 95%; 69-85,7), la prueba Labsystems® tuvo una sensibilidad de 100 % (IC95%; 71,8-100) y una especificidad de 100 % (IC95%; 96-100). Laconcordancia entre ambas pruebas (Labsystems® y Vircell®) fue de 80 %, con un índice kappa de 0,45. Conclusiones. Un punto de corte de un índice 8 para la prueba ELISA IgM anti-Toxoplasma de Vircell® y un punto de corte de 16 inmunounidadesenzimáticas por Labsystems®, permiten identificar infecciones congénitas en sangre de cordón umbilical en niños colombianos.

Objectives: To evaluate and validate the detection of anti-Toxoplasma IgM ELISA in umbilical cord blood by means of two different commercialassays and to correlate the results with the diagnosis of congenital infection in children by serological follow up and clinical data. Materials and methods: We evaluated the commercial anti-Toxoplasma IgM ELISA kitÔ from Vircell (Granada, Spain) compared to the results of Toxoplasma IgM Western blotÔ (LDbio, Lyon, France) and IgM ELISA testÔ from Labsystems (Finland). We obtained the receptor-operator curve (ROC) for the IgMELISA assay form Vircell and Labsystems. We studied 105 umbilical cord blood serum samples from Colombian children from six different cities by Westernblot, and clinical and serological follow up for positive cases. The kappa agreement index was determined for the 105 sera obtained from umbilical cords. Results: The Vircell assay showed a better performance with a cut-off index of 8 against a 16 for Labsystems for enzyme immunounits (EUI). Whenthe results were evaluated against the Western blot assay, the Vircell IgM assay had a sensitivity of 100% (IC95%: 71.8-100) and a specificity of 78%(IC95%: 69-85.7), the IgM assay from Labsystems had a sensitivity of 100% (IC95%; 71.8-100) and a specificity of 100% (IC95%; 96-100). Agreement between both tests (Labsystems and Vircell) was 80% and had a kappa index of 0.45. Conclusions: A cut-off point of 8 for the anti-Toxoplasma IgM ELISA assay from Vircell and 16 EIU for the Labsystems assay allow the identificationof congenital infections in umbilical cord blood samples from Colombian children.

Utilidad de la detección de células citomegálicas circulantes en pacientes inmunosuprimidos VIH negativos en el control de la infección por citomegalovirus / Presence of circulating cytomegalic cells in HIV negative immunosuppressed individuals following cytomegalovirus infection

Objetivo. Buscar la correlación entre la presencia de células citomegálicas circulantes con la antigenemia pp65 para citomegalovirus y el desarrollo de complicaciones clínicas inherentes a infección y enfermedad por citomegalovirus. Materiales y métodos. Entre diciembre de 2002 y julio de 2003 se procesaron 110 muestras de sangre periférica, obtenidas de 46 pacientes inmunosuprimidos. La antigenemia pp65 y la presencia de células citomegálicas circulantes se determinaron mediante inmuno-fluorescencia indirecta utilizando un estuche comercial para la detección del antígeno pp65 de citomegalovirus. En leucocitos de sangre periférica, la antigenemia fue positiva cuando se encontró una o más células con tinción fluorescente, multilobulada y homogénea en el núcleo celular. Se determinó la presencia de células citomegálicas circulantes cuando se observaron células de gran tamaño (35 a 50 mm) con un patrón de tinción fluorescente extendido en todo el citoplasma celular en células mononucleares de sangre periférica. Resultados. Se encontraron ocho pruebas con antigenemia positiva, procedentes de siete pacientes (15 por ciento). De éstos, cuatro (57 por ciento) también presentaron células citomegálicas circulantes, tres habían recibido un trasplante renal y uno un trasplante hepático. El número de células positivas en la antigenemia fue mayor en los pacientes con trasplante renal que en el resto de pacientes inmunosuprimidos (457 vs.1,96; p<0,005). No se encontró asociación entre la presencia de células citomegálicas circulantes, la morbilidad, la mortalidad y el desarrollo de enfermedad injerto contra huésped (GVHD) (p<0,001). Discusión. No encontramos correlación entre la detección de células citomegálicas circulantes, la antigenemia y la mortalidad en estos pacientes. Sin embargo, es necesario realizar estudios prospectivos con un mayor número de individuos para determinar mejor dicha correlación y definir su utilidad clínica en pacientes inmunosuprimidos

Proteínas celulares cómplices de las proteínas regulatorias y accesorias del VIH-1 / Cellular proteins associated with regulatory proteins from HIV-1

La resistencia del virus de la inmunodeficiencia humana tipo 1 (VIH-1) a medicamentos antivirales ha presionado la búsqueda de métodos alternativos de terapia. En esta revisión, se presenta un análisis de los avances más recientes en el estudio de la interacción entre las proteínas regulatorias y accesorias del VIH-1 con factores celulares, sus efectos en la célula huésped y los beneficios para el virus. Se muestra cómo estas proteínas virales alteran procesos fundamentales de la célula huésped de manera muy precisa y las utilizan para aumentar la replicación viral, evadir la respuesta inmune del hospedero y causar enfermedad